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    葡聚糖凝膠過濾層析填料蛋白純化脫鹽柱

    描述:Prepacked Desalting Column葡聚糖凝膠過濾層析填料蛋白純化脫鹽柱 適用于分子量大于5000Da的蛋白或其他大分子樣品的脫鹽、緩沖液置換或小分子的去除。Prepacked Desalting Column葡聚糖凝膠過濾層析填料蛋白純化 脫鹽柱 裝有8.3 ml Smartdex G-25中。

    更新時間:2024-02-04
    產品型號:Prepacked Desalting Colum
    廠商性質:經銷商
    詳情介紹

    Prepacked Desalting Column 葡聚糖凝膠過濾層析填料蛋白純化脫鹽柱簡介


    Prepacked Desalting Column適用于分子量大于5000Da的蛋白或其他大分子樣品的脫鹽、緩沖液置換或小分子的去除。

    Prepacked Desalting Column 葡聚糖凝膠過濾層析填料蛋白純化脫鹽柱裝有8.3 ml Smartdex G-25中。Smartdex G-25系列介質是以葡聚糖為基質的凝膠過濾層析介質,其工作原理主要是利用具有網狀結構的葡聚糖凝膠的分子篩作用,根據被分離物質的分子大小不同來進 行分離。

    表 1. Prepacked Desalting Column 產品性能

    介質

    Smartdex G-25 

    粒徑

    85-260 pm

    柱體積

    8.3 ml

    最大上樣量

    2.5 ml

    脫鹽效率

    >90%

    排阻極限

    Mr 5000

    保存溫度

    2-8 °C


    2. 使用說明

    2.1緩沖液的準備

    所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22 pm或0.45 pm濾膜過濾。 平衡液為蛋白脫鹽后,用于保護蛋白的溶液,根據客戶需求自行選擇。

    2.2樣品準備

    樣品在上樣前建議離心或用0.22 pm或0.45|jiti濾膜過濾,減少雜質,防止堵塞柱子。

    2.3樣品脫鹽

    脫鹽流程

    圖1.使用Prepacked Desalting Column脫鹽流程示意圖

    1) 脫鹽柱準備

    將Prepacked Desalting Column垂直置于重力柱支架上,或用鐵架臺固定,先后打開上蓋、下蓋,依靠重力流干保護液。

    2) 平衡

    加入4 ml平衡液(自主選擇合適溶液)對預裝介質進行平衡,重復5次,最終使用平衡液體積約3倍介質體積。

    3) 上樣

    加入樣品,樣品上樣體積范圍1.0-2.5 ml,最大不超過2.5 ml,上樣體積不足時用平衡液稀釋樣品至1.0 mlo

    4) 洗脫

    待樣品進入填料后,繼續加入平衡液進行洗脫,分管收集洗脫液,從加入樣品開始,先收集前端2.0 ml,然后再按照固定體積(建議0.5-1 ml/管)收集樣品,檢測每管蛋白濃度和鹽濃度,計算回收率和脫鹽效率。平衡液至少添加至蛋白洗脫*再停止。

    5) 再平衡

    加入4 ml平衡液對介質進行再平衡,重復至少5次,將殘留的鹽沖洗干凈,方可進行下一次脫鹽。同一個柱子不建議用于不同樣品的脫鹽。

    3. 清洗及保存

    如果柱子的流速或者脫鹽效果變差,為除去殘留的雜質,如變性蛋白或脂質等,有時需要對脫鹽柱進行在位清洗。常用的清洗液為0.1-0.2 M NaOH或非離子型去垢劑。

    1) 加入一倍的柱體積0.1-0.2 M NaOH,依靠重力清洗介質。

    2) 加入足夠量的去離子水,沖洗介質,直至pH值至中性。

    3) 加入至少三倍柱體積20%乙醇溶液沖洗介質,然后蓋好上蓋和下塞,在介質上端保留至少1cm高的20%乙醇保護液,置于2-8°C保存。 注:不建議介質多次重復再生和使用。

    4 .Prepacked Desalting Column 葡聚糖凝膠過濾層析填料蛋白純化脫鹽柱 訂購信息

    試劑訂購

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